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骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法、Goldner三色染色法等，而Goldner三色染色又称戈德纳三色染色，与Masson三色染色类似，三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。

三色染液染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，该染液多用于骨类物质的染色，对细胞染色效果较好，尤其适用于代谢性疾病(Paget病、骨性营养不良等)的研究，以评估成骨细胞和破骨细胞的活性，并容易辨认骨髓中的转移性肿瘤细胞。

• 切片脱蜡应尽量干净。
  
• 固定起着重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
  
• 取Weigert染液A、B等量混合即为Weigert铁苏木素染液，一般24h失去染色力。
  
• 酸性分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
  
• 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制0.1～1%乙酸溶液予以替代。
  
• Orange G染色液染色时在镜下控制，以丽春红脱去为准。

• 切片二甲苯或脱蜡透明液脱蜡或脱塑料，乙醇漂洗，入水。
  
• 入配制好的Weigert铁苏木素染色液染色20～30min。
  
• 流水冲洗1min，用酸性分化液迅速分化(一般＜5s)，流水冲洗5min，蒸馏水稍洗。
  
• 入Acid Ponceau染色液染色5min。
  
• 在上述过程中按蒸馏水∶弱酸溶液=4∶1比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗15～30s。
  
• 入Orange G染色液染色至脱去Acid Ponceau染色液的红色，一般需要3～10min。
  
• 用配制好的弱酸工作液冲洗15～30s。
  
• 直接入亮绿染色液中染色5min，用配制好的弱酸工作液冲洗3次，每次15s。
  
• 蒸馏水冲洗，吸干或晾干，无水乙醇快速脱水，二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固。